本试剂盒仅限于科学研究用途，不得用于医学诊断。本文将介绍Renalase(RNLS)ELISA试剂盒的使用说明。

检测原理

本试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验（ELISA）。在预先包被adropin（AD）抗体的微孔中，依次添加样本、标准品及HRP标记的检测抗体，经过温育和彻底洗涤后，使用TMB底物进行显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色，再在酸性环境中变为最终的黄色。颜色的深浅与样品中adropin（AD）的浓度呈正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），进而计算样品的浓度。

样品收集、处理及保存方法

1. 血清： 使用不含热原和内毒素的试管，避免在操作过程中刺激细胞。采血后进行3000转离心10分钟，以迅速小心地分离血清与红细胞。

2. 血浆： 使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝，进行3000转离心30分钟，取上清液。

3. 细胞上清液： 进行3000转离心10分钟，以去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆： 将组织加入适量的生理盐水并捣碎，再进行3000转离心10分钟，取上清液。

5. 保存： 如果样本在收集后未能及时检测，请将其按一次用量分装并冷冻于-20℃，以避免反复冻融。在室温下解冻时，确保样品均匀充分解冻。

操作注意事项

试剂盒组成说明：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、25、50、100、200、400pg/mL。

试剂的准备：将20×洗涤缓冲液按1:20的比例使用蒸馏水稀释，即1份20×洗涤缓冲液加入19份蒸馏水。

结果判断

为绘制标准曲线，您需在Excel工作表中以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准品的线性回归曲线，并按照曲线方程计算各样本的浓度值。值得注意的是，使用本试剂盒所获得的结果仅供研究参考。

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