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内毒素蛋白溶液ELISA实验流程 - 人生就是博-尊龙凯时

发布时间:2025-03-11   信息来源:怀琛罡

人生就是博-尊龙凯时的内毒素(ET) ELISA试剂盒仅供科学研究使用,严禁用于医学诊断。本试剂盒采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA),其检测原理如下:

内毒素蛋白溶液ELISA实验流程 - 人生就是博-尊龙凯时

在预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,依次添加样本、标准品及HRP标记的检测抗体。经过充分的温育和清洗后,加入底物TMB进行显色反应,TMB在过氧化物酶的催化下转变为蓝色,随后在酸性条件下变为最终的黄色。显色的深浅与样本中adropin(AD)的浓度呈正相关。最终,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),进而计算样品的浓度。

样品收集、处理及保存方法如下:

1. 血清:需使用不含热原和内毒素的试管,操作时避免任何细胞刺激。采集血液后,3000转离心10分钟,迅速小心分离血清与红细胞。

2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝剂,3000转离心30分钟后取上清。

3. 细胞上清液:3000转离心10分钟以去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合搅拌,3000转离心10分钟后取上清。

5. 保存:如样本未能及时检测,请将样本按一次用量分装并低温(-20℃)冻存,避免反复冻融,使用前在室温下确保样本充分解冻并均匀。

在准备试剂时,需将20×洗涤缓冲液按1:20比例稀释,即1份的洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

此外,为了确保结果的准确性,需绘制标准曲线:在Excel表格中,以标准品浓度为横坐标,以对应的OD值为纵坐标,构建线性回归曲线,并根据方程计算各样本的浓度值。

最后,使用人生就是博-尊龙凯时的试剂盒进行实验时,请务必遵循相关操作注意事项。