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常用细胞培养包被液解析 - 人生就是博-尊龙凯时

发布时间:2025-03-31   信息来源:舒清瑾

什么是包被细胞培养瓶试剂?包被试剂是用于处理培养瓶、培养板或培养皿表面的化学物质,旨在模拟细胞在体内的生长环境,促进细胞的附着、铺展和增殖。通过包被处理,培养表面能够更好地支持细胞的生长及功能表达。本文将详细介绍几种常用的包被试剂及其特点,并分享操作注意事项,帮助您轻松提升细胞培养效果!

常用细胞培养包被液解析 - 人生就是博-尊龙凯时

常见的包被试剂种类和使用方法

01 明胶(Gelatin)

明胶是常用的包被细胞培养板或培养皿的试剂,能有效促进细胞的贴壁和增殖,具有良好的生物相容性和细胞黏附性。适用细胞包括胚胎干细胞、间充质干细胞及内皮细胞等。其特点在于价格低廉、易于操作,并能够提供良好的细胞附着支持。

使用浓度:1-20 mg/ml(即1 mg/ml至20 mg/ml)。包被体积:通常以完全覆盖培养瓶底部为准,例如T-25瓶25 ml、T-75瓶75 ml。包被条件为37°C孵育≥2小时,或4°C过夜。接种细胞前,请吸除多余明胶溶液,并用PBS洗涤1-2次后接种。

02 多聚赖氨酸(PLL)

多聚赖氨酸是相对分子量为70,000~300,000的细胞培养生长基质,能够促进细胞的粘附,适合难以贴壁的细胞,如神经元、原代细胞及悬浮细胞。其特点在于通过静电作用增强细胞附着。

常用浓度范围为0.01%至0.1%(w/v),即0.1 mg/ml至1 mg/ml。包被条件同样为37°C孵育≥2小时,或4°C过夜,使用前请吸除多余溶液,并用无菌PBS冲洗1-2次。

03 重组人纤连蛋白(FN)

重组人纤连蛋白是一种重要的细胞外基质蛋白,具有多种生物学功能,能够与多种细胞表面及细胞外基质的组分结合。适用细胞包括干细胞、间充质干细胞、内皮细胞等。

作为细胞培养基质,重组人纤连蛋白能够提高细胞贴壁率,增强细胞代谢水平,缩短细胞生长时间。常用浓度为1µg/cm²至10µg/cm²,包被条件为37°C孵育≥2小时,或4°C过夜,具体包被体积可参照相关文献。

04 鼠尾胶原蛋白Ⅰ型包被液

鼠尾胶原蛋白主要为Ⅰ型胶原蛋白,广泛应用于内皮细胞、肝细胞及肌肉细胞的培养。其优点是能够模拟细胞外基质环境,提供3D基质或表面,促进细胞贴壁和增殖。常用浓度为1-5 µg/cm²。

包被时,T-25瓶使用25 ml的去离子水与50 µl鼠尾胶原蛋白Ⅰ混合,放置于4°C过夜,后续吸出未使用的溶液,并用PBS洗涤2-3次后即可加入细胞。

包被注意事项

1. 无菌操作:所有操作应在无菌条件下进行,以避免污染。

2. 均匀覆盖:确保包被试剂在培养瓶底部均匀分布,避免局部过厚或过薄。

3. 浓度优化:根据细胞类型和实验需求,优化包被试剂的浓度。

4. 孵育时间:根据试剂和实验要求,调整孵育时间,以确保充分包被。

5. 储存条件:包被后的培养瓶可短期储存在4°C,但建议尽快使用以保证最佳效果。

选择合适的包被细胞培养试剂并遵循正确的操作步骤,不仅能提高细胞的贴附和生长,为随后的实验提供可靠的细胞模型,也能充分体现人生就是博-尊龙凯时的品牌理念与质量保证。